赵丹童步生段茂利
安徽医院医院耳鼻咽喉头颈外科
安徽医院耳鼻咽喉头颈外科
瑞典皇家医院耳鼻咽喉头颈外科和临床科学干预及技术系
内淋巴积水(endolympphatichydr-ops)是多种内耳疾病的病理特征,大多数的感音神经性听力损失均起源于耳蜗病变。
包括梅尼埃病(Meniere`sdisease)、迷路炎、突发性耳聋、老年性聋、药物或噪音聋。
资料与方法
实物动物
实验中所使用的SPF级成年豚鼠由北京维通利华实验动物有限公司提供,许可证号SCXK(京)-。
器械和试剂
器械:
耳内镜(HS-OT10D光纤检耳镜)、小动物生命检测仪、动物护理取暖器保温系统、美国MATRX动物麻醉机(北京益仁恒业科技有限公司);AgilentTecholohgies9.4T实验用MRI系统。
试剂:
钆喷酸葡胺注射液(马根维显,北京北陆药业股份有限公司)、异氟烷(深圳市沃德生命科技有限公司)。
手术过程
异氟烷面罩吸人麻醉动物取仰卧位,颈部手术区脱毛,在颈部正中作一切口,长约2.0cm,逐层分离皮下组织,钝性分离肌层。
术中妥善止血,仔细解剖颈部血管,分离右侧静内静脉,将静脉挑出并在静脉下穿过2根细丝线,先结扎静脉远侧端,用动脉夹夹闭已游离静脉的两端。
在中间切开一个小口子,插人内径0.28mm,长约1m的PE10导管,深约3cm,结扎近侧丝线,并将导管结扎固定。
然后逐层缝合切口,导管的另一端从颈部背皮下穿出,然后固定导管,导管体外的一端连接注满扎喷酸葡胺的1ml注射器。
MRI扫描
手术后将豚鼠以俯位放人AgilentTecholo-
gies实验用MRI系统中进行耳蜗MRI扫描;该系统为场强9.4T、孔径mm的动物MRI系统。
采用体线圈用于射频发射和信号接收,将射频线圈放置于已麻醉豚鼠的头部,调整位置使豚鼠听泡处于MRI扫描的中心。
MRI图像处理
使用ImageJ软件对MRI图像进行图像灰度值提取,每个研究部位分别取5个像素读取图像灰度值然后取平均值,尽量避免取图像的边缘部分。
统计学方法
利用软件读取的图像灰度值以X±S表示,用GraphPadPrism5软件对结果进行one-wayANOVA分析,P0.05为差异具有统计学意义。
结果
MRI图像扫描结果
分别在造影剂注射前、注射后10、30、60、90和min对豚鼠内耳进行MRI扫描,未注射造影剂之前豚鼠的耳蜗和前庭轮廓显示模糊。
无法分辨内、外淋巴液,注射造影剂后10min可见前庭、耳蜗的底转、第二转、第三转及顶转均有轻度显像。
注射30和60min后耳蜗各阶显像逐阶增强,注射90min时耳蜗前庭半规管均充分显影,可以清晰分辨出内外淋巴液,min时图像显影较90min时无明显增强(图1)。
注射对比剂前后豚鼠双侧内耳MRI动态耳影
实验中5只豚鼠在90min时耳蜗各阶均完全显影,60min时也取得较满意的显影结果,min时显影效果与90min时无明显区别。
则可得出注射造影剂后90~min是MRI扫描观察豚鼠耳蜗结构的最佳时间段,因min扫描时间较长,增加豚鼠死亡风险,故以90min为最佳观察时间。
图像灰度值提取结果
为了对造影剂的代谢进行定量分析,首先使用ImageJ软件对不时间点对耳蜗各部位的图像灰度值进行定量采集(表1)。
豚鼠颈内静脉注射对比剂后不同时间点内耳各部位MRI图像灰度值
灰度值的提取在耳蜗的底转第二转、第三转及顶转四个部位进行(图2)。
豚鼠颈内静脉注射造影剂后不同时间点耳蜗四个部位图像灰度变化曲线图
讨论
内淋巴积水是由各种原因,包括内耳缺血缺氧病毒感染、遗传因素、免疫损伤和内分泌障碍等,导致毛细血管壁通透性增高。
引起内淋巴液生成过多或内淋巴囊吸收障碍,影响内淋巴液的循环,则导致内耳膜迷路积水,其最先被认为是梅尼埃病的病理特点。
后来的研究发现内淋巴积水也是突发性聋伴眩晕、急性低频感音神经性听力损失、迟发性膜迷路积水综合征及自身免疫性内耳疾病的病理改变。
END
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